- 血清熱滅活對細胞的影響
- 點擊次數(shù)：3601 更新時間：2016-03-10
Pinyopummintr等證明血清去除滅活步驟不影響牛胚胎的發(fā)育分化；有研究結(jié)果證實熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對細胞的促粘附作用，在用SV-BHK、BALB-3T3、CV－1、FS-4細胞對細胞粘附實驗中，熱滅活對胎牛血清的影響小于對小牛血清的影響。
我們調(diào)查了熱滅活對胎牛血清以及對其中不同細胞株生長能力的影響。通過比較11個不同細胞株，發(fā)現(xiàn)其中熱滅活對6個細胞株（HBAE，MDBK，Vero，成纖維細胞，MRC-5）的生長帶來負面影響，三個細胞株（FOX-NY，MDCK和CHO-K1）不受熱滅活的影響，而只有兩個細胞株（Balb/3T3，Sp2/0Ag14 hybrid），在熱滅活之后，細胞生長有輕微的改善。所以，在正常的操作下，熱滅活通常對細胞的生長沒有明顯的促進作用。在正常操作下，熱滅活經(jīng)常給血清產(chǎn)品帶來負面的影響，對血清的加熱經(jīng)常導(dǎo)致血清中沉淀的產(chǎn)生，而導(dǎo)致的沉淀又常常被認為是微生物的污染。注意到這個現(xiàn)象之后，為了驗證污染的存在，或者促進沉淀的溶解，許多培養(yǎng)者往往將血清放置37℃溫育。這卻往往使情況變得更糟，血清中的蛋白進一步的析出，為了確信血清未被污染，進行的鏡檢，無菌培養(yǎng)試驗，和革蘭氏染色試驗更是浪費了實驗者大量的時間和精力。
總之，多數(shù)細胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的。很多場合下，熱滅活并不會改善細胞的生長，卻降低了支持細胞生長的能力。即使在少數(shù)有促進的情況下，其促進的比率也是微不足道的。另外，血清的熱滅活導(dǎo)致的沉淀常常被認為是微生物的污染，從而給用戶和供應(yīng)商都帶來不必要的麻煩。我們建議，對于那些對血清進行滅活的用戶，需要通過試驗來證實其必要性，確定滅活的適當條件；在滅活過程中，需要嚴格認真監(jiān)測，并選擇一個可重復(fù)的方案進行操作。
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