- Hygromycin B 潮霉素B（抗生素）
- 型號：FS0012
- 報(bào)價(jià)：600
- 地區(qū)：上海市
- Hygromycin B 潮霉素B（抗生素）用于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)溶解后過濾除菌。推薦溶劑水，PBS溶液。蛋白質(zhì)合成抑制劑，可用于植物細(xì)胞培養(yǎng)等生化研究。CAS : 31282-04-9
- 021-34600120
Hygromycin B 潮霉素B（抗生素）
產(chǎn)品信息：
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
FS0012-1G | Hygromycin B 潮霉素B（凍干粉） | 1g | 600.00 |
FS0012-5G | Hygromycin B 潮霉素B（凍干粉） | 5g | 2400.00 |
FS0012-10G | Hygromycin B 潮霉素B（凍干粉） | 10g | 3840.00 |
FS0012-10ML | Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B（50 mg/ml） | 10ml | 680.00 |
FS0012-20ML | Hygromycin B (50 mg/ml) 潮霉素B（50 mg/ml） | 20ml | 1050.00 |
性狀/儲存 | -20℃保存（干粉），4℃保存（液體） | ||
產(chǎn)品屬性：
別名 : 濕霉素乙 效高素 潮霉素B干粉
英文名稱 : Hygromycin B
CAS : 31282-04-9
儲存條件 : -20℃
Hygromycin B 潮霉素B（抗生素）生物應(yīng)用：
1） 篩選和維持培養(yǎng)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Hph+載體的原核細(xì)胞或真核細(xì)胞（植物細(xì)胞和哺乳動(dòng)物細(xì)胞）；
2） 由于作用模式的差異，常與G418 (GeneticinTM)，Zeocin™ 和blasticidin S聯(lián)合使用，篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染兩個(gè)不同載體的細(xì)胞株；
雙抗性穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選的抗生素作用機(jī)制及抗性 | |||
抗生素 | 抗性機(jī)制 | 抗性基因 | 哺乳動(dòng)物篩選濃度 |
潮霉素B | 干擾70S核糖體易位和誘導(dǎo)對mRNA模板的錯(cuò)讀 | Hph | 200~500μg/mL |
G418 | 干擾80S核糖體功能和抑制蛋白合成 | Tn5/Tn601 | 100~1000μg/mL |
Zeocin | 摻入或者切割DNA引起細(xì)胞死亡 | Sh ble | 50~100μg/mL |
blasticidin S | 核糖體上抑制肽鍵形成 | Bsd/BSD | 3~50μg/mL |
3）抗病毒劑，由于潮霉素B選擇性滲透進(jìn)入病毒感染增強(qiáng)通透性的細(xì)胞，而且具有抑制翻譯的功效；
4）作為驅(qū)蟲藥加入動(dòng)物飼料；
應(yīng)用濃度：
潮霉素B用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化。推薦使用濃度為50-1000 μg/mL，濃度需要?dú)缜€來確定。
哺乳動(dòng)物細(xì)胞·200-500 μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞·100-300 μg/mL；真菌·300-1000μg/mL；
產(chǎn)品使用：
使用一：殺滅曲線確定殺死濃度（僅作參考，因個(gè)人檢測體系而異）
（1）往組織培養(yǎng)級的96孔板內(nèi)加入未轉(zhuǎn)染細(xì)胞，細(xì)胞密度約50-200細(xì)胞/孔；細(xì)胞貼壁之后，往每孔加入含不同濃度（如50-1000μg/mL，至少5個(gè)濃度）潮霉素B的200μL新鮮培養(yǎng)基；
（2）37℃，5% CO2培養(yǎng)箱孵育細(xì)胞10-14天；
（3）培養(yǎng)5-7天后更換新的培養(yǎng)液，培養(yǎng)液內(nèi)含有相應(yīng)濃度的潮霉素B；
（4）10-14天后使用細(xì)胞增殖方法如MTT，CCK-8等評估細(xì)胞活力；也可以通過檢測細(xì)胞克隆數(shù)或百分比匯合率來確定毒性效應(yīng)。一般選擇在10-14天能夠殺死所有細(xì)胞的zui小濃度為篩選濃度。
使用二：篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞
（1）對于貼壁細(xì)胞，直接吸去60mm培養(yǎng)皿內(nèi)的轉(zhuǎn)染細(xì)胞培養(yǎng)基，然后加入含有潮霉素B的新鮮培養(yǎng)基5-6ml；對于懸浮細(xì)胞，無菌條件250x g,離心10min除去舊的轉(zhuǎn)染細(xì)胞培養(yǎng)基，然后懸浮在約5ml的含潮霉素B的新鮮培養(yǎng)基；
（2）5-7天后，如上方法更換含有潮霉素B的新鮮培養(yǎng)基；
（3）再孵育細(xì)胞5-7天；
（4）10-14天孵育后，培養(yǎng)體系中只含有能夠表達(dá)潮霉素B抗性表型的活細(xì)胞。因此篩選之后如步驟一，更換不含潮霉素B的新鮮培養(yǎng)基。
